经验交流高效液相色谱法分析色酒中有机酸的研究王玉君李烈英孙永乐*杨温夫(中国科学院海洋研究所,青岛,266071)(化工部劳动保护研究所,青岛,266071)酒中有机酸的种类、含量和构成不同,形成酒的各种风味和品质[1]。适量的有机酸能促进食欲、助消化,益于健康。因而酒中有机酸的分析对酒的品评很有意义。国外有把酿酒过程中有机酸的变化做为发酵管理过程中的主要指标[2]。酒中有机酸的分析多采用比色法和气相色谱法,但须做成衍生物再分析,手续繁杂。近年来采用高效液相色谱法(HPLC)直接分析,简便、准确,不断有文献报道[3,4]。但色酒尤其是黄酒中有机酸品种较多,仍给分析带来很多困难,全分析数据一直未见报道。在这方面,我们开展了研究工作。实验部分(一)仪器设备Waters液相色谱仪,主要包括:M45泵,441紫外检测器,730数据处理机等。(二)试剂有机酸标准均为分析纯或化学纯试剂,而焦谷氨酸为谷氨酸在pH2.4条件下脱水3小时制得。色谱柱皆为径向加压柱,Waters公司产。洒样:市售花雕酒(绍兴)、加饭酒(绍兴)、即墨老酒、葡萄酒(青岛)、白兰地酒(烟台)等。注射前先经Sep-PakC18柱预处理。(三)实验步骤:分别在反相C18柱和阴离子交换柱上用KH2PO4缓冲液做流动相,观察pH值变化、KH2PO4浓度、流动相流速对有机酸分离的影响;选定最佳分离条件,测定烁各种有机酸的保留参数和在214nm和254nm时紫外吸收波长的校正因子。全过程均用外标法。结果与讨论经实验筛选,得到酒中常见十四种有机酸在C18柱上的最佳分离条件为0.2mol/L KH2PO4(H3PO4)缓冲液,pH2.37,lml/min;在阴离子交换柱上最好分离条件为0.02mol/L KH2PO4(H3PO4),pH2.4,lml/min。表1列出十四种有机酸电离常数pK1值与容量因子k'及校正因子FR的关系。由表1可见:14种有机酸在两种柱上均能良好分离。用C18柱分离,在214nm波长检测均有吸收,在254nm波长下多数有机酸无吸收。分析时在214nm波长检测为好,在254nm波长下谱图能起辅助定性作用。各有机酸本身的特性决定了在一定条件下的色谱保留值k'。我们研究了电离常数与k'的关系,结果如图1、2,可见对于判断分离效果有一定指导作用。用该法分别对即墨老酒、花雕酒、葡萄酒等色酒进行了分离分析,如图3、4为即墨老酒和花雕酒的分离谱图,分离效果良好。总之分离以Cl8柱为主,以阴离子柱为辅;检测以214nm波长为主,以254nm为辅助定性。此法分*通讯联系人析饮料中有机酸直接检出每毫升饮料的最低含量分别为:富马酸20ng,草酸、丙酮酸、抗坏血柠檬酸、丙二酸、苹果酸:4μg,葡萄糖酸、谷氨酸、琥酸、乳酸:1μ。低于上鲜述浓度就需先浓缩富集后,再进样分析。酸:500ng,焦谷氨酸1μg,酒石酸2μg,乙酸、表1十四种有机酸p1值与k'、FR的关系Study on the Determination of Organic Acids in RiceWine by High Performance Liquid ChromatogrophyWang YujunLi LieyingInstiute of Oceanology,Academia SinicaQingdao266071;Sun Yongle and YangWenfuOccupational Safety and Health Research Insti-tute Ministry of Chemical IndustryQingdao266071A HPLC system that makes it possible to accuratelyand simultanecously quantitate l4 several commonorganic acids in rice wineAmong the columns that wasused in the experimentC18column was the bestOnly参考文献after a single Sep-Pak C18pre-column treatmantthesamples can then be analysedBy using the UV 214nm.all the organic acids have higher absorptionsthe concen-tration range that using this method to determine directy[1] 赵光鳌等,江苏食品与发酵,(2),18(1982)。[2]卢杏芬等,贵州酿酒、(2),41(1981)。[3] C.Drog et al.Schweiz ZObstweinbau118(15),434(1982).[4] CGBarroso et al.Chromatographia17(15),249(1983).the organic acids in beverages is 20 ng/ml-4μg/ml(different with the kinds of organic acids).离子色谱法同时测定地质样品中的氟和氯蒋仁依(北京矿产地质研究所,100012)张洪波(寿王坟铜矿,河北承德)徐建平(南京大学,210008)离子色谱法(IC)测定地质样品中氟和氯,已有过报道[1-。我们用水蒸汽快速蒸馏分离氟