理论广角 Ｉ■ Ｃｈｉｎａ ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｒｅｖｉｅｗ 解析分光光度法测定氨苄西林胶囊的含量 王瑜 （哈药集团制药总厂） ［摘要］目的：研究分析利用分光光度法测定氨苄西林胶囊含量时的测量条件与具体方法，为改进氨苄西林胶囊质量检测方法提供一定的参考依据。方法： 利用分光光度法进行含量测定，通过分Ｊｌ￣：４９６ｎｍ波长下的吸光度来得出氨苄西林在胶囊中的含量。结果：通过对照组和实验组的测量分析，可以得知利用分光光度 法进行氨苄西林胶囊的含量测定是非常可行的，测定结果十分可靠准确。结论：在氨苄西林胶囊的生产制备中，完全可以采用分光光度法来进行质量检测。 ［关键词］分光光度法；氨苄西林；胶囊；含量；测定 中图分类号：ＴＤ３３２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００９—９１４Ｘ（２０１５）１０—０３４６—０１ 作为当前西药临床治疗中较为常见的一种抗菌类药物，氨苄西林胶囊的应 ２．３所示方法的６ｏ％左右。因此在实验中应先将氢氧化钠和盐酸羟胺混合后，再 用非常广泛。其可以对敏感菌所导致的各种感染炎症进行治疗，能够起到很好 加入氨苄西林溶液 的杀菌抑菌效果。目前，氨苄西林胶囊已经形成了较为成熟的工业生产流程，但 ２．１．６羟肟酸铁的稳定性．反应所生成的羟肟酸铁的吸光度随放置时间延 是在对氨苄西林胶囊的质量进行测定时，所使用的测定方法却较为复杂，操作 长而逐渐减小，但变化较小。自加入三氯化铁后１５～２０ｍｉｎ吸光度仅减小Ｏ．５８％。 不是十分简便，这就位氨苄西林胶囊的工业生产质量控制带来了一定的不便。 由于在加人三氯化铁后会与反应剩余的盐酸羟胺作用产生气体，因此需放置一 一般情况下，对于氨苄西林含量的测定多采用剩余碘量法，但是这种测定 段时间后再测定。根据吸光度的变化情况，可选择放置１５ｍｉｎ后进行测定 方法中，青霉噻唑酸会处于酸性环境中，其在被碘氧化的过程中往往会受到反 ２．２吸收光谱 应温度、酸碱度以及反应时间等多种因素的，任何一个因素控制不当，都可 精密量取氨苄西林对照品溶液 。 能会导致检测结果出现较大误差。也就是说，采用剩余碘量法进行氨苄西林胶 ３．０１１１１，按１．２．３方法加入其他试剂 ｏ．｛ 囊的含量测定时，耗碘量并没有一个固定的当量关系，这样一来，要想保证测定 反应后，在４０ｏ～６Ｏ０ｎｍ波长范围内 结果的精准度，就必须要严格控制各项测定条件，并且必须使用标准品进行对 扫描吸收光谱，见图１。 ｏ ２ 照测定。这样的测定方法不但操作麻烦，且测定结果精准度低。为此，需要对其 结果表明，羟肟酸铁络合物的 含量检测方法进行一定的改进。 最大吸收波长为４９６ｎｍ。 ０ ４００ ４４ｏ 口８ｏ ５２ｏ ５６ｏ ６ｏ０ 在此本文提出一种新的含量检测方法，即采用分光光度法进行测定。其测 ２ ３标准曲线 波长（ｎｍ） 定原理是青霉素类的抗生素药物能够和盐酸羟胺发生反应而生产一定的羟肟 精密量取氨苄西林对照品溶液 酸衍生物，而这种衍生物能够在一定条件下和铁离子发生化学反应而生成一种 １．０，２．０，３．０，４．０，５．０ｍｌ，分别置于 图１羟肟酸铁络合物吸收光谱 红色络合物，通过分光光度法可以测定出其吸光度，并以此可以得出氨苄西林 ２５ｍ１．￣－量瓶中，照１．２．３方法显色测 （一：试剂空白一蒸馏水…：羟肟酸铁 的含量测定结果。 定，以吸光度（Ａ尉氨苄西林的浓度 络合物一试剂空白） １ 材料与方法 （ｃ）绘制标准曲线。线性回归方程为：Ａ＝Ｉ．７８６Ｃ＋０．０２０４，相关系数ｒ＝－０．９９９４。 １．１仪器与试剂 其浓度在０．１～０．５ｍｇ／ｍｌ范围内线性关系良好。 Ｉ．１．１试剂。氨苄西林对照品（中国药品生物制品检定所），氨苄西林胶囊 ２ ４样品测定 （市售，标示量为０．２５ｇ／粒）；盐酸羟胺、三氯化铁、氢氧化钠、盐酸均为分析纯。 准确量取样品溶液３．０ｍｌ，照１．２．３方法测定，计算标示量％，并与碘量法对 １．１．２仪器。７５３０型分光光度计（上海第三分析仪器厂）。 照。实验结果表明氨苄西林含量为９０．７％，相对标准偏差为０．３ （ｎ＝６），与碘量 １ ２实验方法 法测定结果（氨苄西林含量为９０．８％）无显著性差异。 １．２．１对照品溶液配制。准确称取适量氨苄西林对照品，用蒸馏水溶解， ２．５回收率试验 转入ｌＯＯｍｌ￣－量瓶，定容为２．５ｒａｇ／ｍ１的溶液。 在样品溶液中加入一定量的氨苄西林对照品溶液，按实验方法测定并计算 １．２．２样品溶液的配制。准确称取适量氨苄西林胶囊内容物（约相当于 回收率，结果见表ｌ，回收率为９９．２％～１０１．４％。 ２５０ｉｎｇ氨苄西林），用蒸馏水溶解并稀释成１００ｍｌ，滤过，取续滤液用于测定。 ３ 讨论 Ｉ．２．３测定方法 在２５ｍｉ：￣量瓶中依次加入４．３％ＮａＯＨ溶液和１％盐酸羟 由上述实验结果可以看出，采用分光光度法进行氮苄西林胶囊的测定，其 胺溶液各２．０ｍｌ，准确加入适量氨苄西林溶液，放置５ｍｉｎ，再加入９％盐酸１．５ｍｌ 测定结果与剩余碘量法测定结果并无显著差异，且本实验的样品回收率也较为 和９％三氯化铁溶液３．０ｍｌ，定容后放置ｌ ５ｍｉｎ。以试剂空白为参比溶液，在 理想，这就说明在测定氨苄西林胶囊的氨苄西林含量时，完全可以采用这种测 ４９６ｎｍ波长处测定吸光度值。 定方法，其不但简单易操作，且检测效率较高。 ２ 结果 采用分光光度法对氨苄西林胶囊进行含量测定时，其所利用的基本原理是 ２ １测定条件的选择 氨苄西林的成分中含有一定的Ｄ—内酰胺环，其在碱性环境中能够与盐酸羟胺发 ２．１．１盐酸羟胺用量 分别用不同量的盐酸羟胺与氨苄西林反应，结果表 生反应，生成一定的羟肟酸衍生物。其所生成的羟肟酸反应物可以在中性介质中 明，当盐酸羟胺用量＞１．５ｍｌｌ￣，吸光度趋于平稳。考虑到过量的盐酸羟胺会与 与瞄＋发生化学反应，生成一种颜色为红色的羟肟酸铁络合物，而分光光度法正 Ｆｅ３＋发生反应，产生气体，给测定造成困难，因此实验中选用ｌ％盐酸羟胺２． 是对这种红色物质进行吸光度测量以得到氨苄西林胶囊含量测定结果的。这是 ０ｍｌ。 因为在一定范围内，羟肟酸铁络合物的吸光度与氨苄西林的含量呈现出一种线 ２．１．２三氯化铁用量。固定其他条件，改变三氯化铁用量进行试验，结果 性关系，可以通过其线性关系来得出氨苄西林的含量。检测效果较为理想。 表明，当加入９％三氯化铁溶液３．０ｍｌ时，吸光度最大。 但是值得一提的是，在采用分光光度法进行测定时，也需要在一定的条件 ２．１．３盐酸用量。氨苄西林与盐酸羟胺形成的羟肟酸衍生物需在中性条 下进行，如合理控制盐酸羟胺、三氯化铁和盐酸的用量，再例如反应时间的控制 件下与铁络合，因此需加入盐酸中和前一步反应中加入的氢氧化钠。当盐酸用 以及试剂添加的顺序等，都需要特别注意。另外要特别注意的是，测定实验中要 量太少时，Ｆｅ３＋会形成氢氧化铁沉淀，而盐酸量太大，则吸光度减小籀 试验确 以合理的顺序添加各样试剂，应该先将氢氧化钠与盐酸羟胺混合后，再加入氨 定９％盐酸用量为１．５ｍｌ。 苄西林。这是因为如果先将氨苄西林与氢氧化钠混合，再加入盐酸羟胺，则吸光 ２．１．４氨苄西林与盐酸羟胺的反应时间．当氨苄西林与盐酸羟胺的反应 度明显降低，会影响到最终的检测结果。 时间超过５ｒａｉｎ后，吸光度无明显变化，因此可选择５ｍｉｎ￣为试验条件。 总之，在对医药市场中的氨苄西林胶囊进行质量检测时，完全可以利用分 ２．Ｉ．５试剂加入顺序．该测定过程中试剂的加入顺序对吸光度有显著的 光光度法来进行测定，其ＲＳＤ为０．９４％，回收率几乎可达１００％，并且检测结果十 影响，若在氨苄西林溶液中依次加入氢氧化钠和盐酸羟胺，则测定结果仅为１ 分准确可靠，值得在氨苄西林胶囊的质量检测和含量测定中推广使用。 表１氨苄西林回收率试验结果 参考文献 ［１】鞠朋举，宋继红．高效液相色谱法测定氨苄西林胶囊的含量［Ｊ】．黑龙 江科技信息．２０１０（４０）． ｆ】 ２４ ｔ ２５７ ８ Ｏ ９ ９ ８ 【２１黄双路，陈伟，罗红斌．分光光度法测定氨苄西林胶囊的含量…．福 ：５ｌ４ ｑ ３ ５ｌ （Ｈ】５ ｎ ９４ 建医科大学学报．２００２（０２）． ４ ３３¨ ２Ｓ， Ｓ 【）４ 【Ｉ】 ４ ［３】张新元，董莹．氨苄西林胶囊微生物限度检查方法学验证的探讨【Ｊ】．黑 “８２４ ９９ ２ 龙江科技信息．２０１ ｏ（０５）． ３４６ ｌ科技博览
