肝素的提取也称为肝素的分离纯化,一般采用生物制药技术对肝素进行提取和分离。具体操作流程如下:
1. 将猪或牛的肺或肉类均匀切成小块,加入盐水搅拌均匀。
2. 用醋酸钠缓冲液调节pH值,使pH值保持在5.0—5.5之间。
3. 加入蛋白酶及胰酶发酵消化,分离出肝素。
4. 用甲醇或乙醇进行沉淀,收集沉淀物并冷冻干燥。
5. 使用薄层色谱或高效液相色谱对肝素进行分离纯化,得到纯的肝素。
肝素的鉴定:
1. 纯度检测:使用高效液相色谱检测肝素的纯度。
2. 分子量检测:使用凝胶过滤色谱或梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳检测肝素的分子量。
3. 活性检测:使用凝血酶原时间等生化实验检测肝素的活性。
4. 结构分析:通过核磁共振、质谱等手段对肝素的结构进行分析。
总之,在提取肝素时要注意操作规范,确保肝素质量达到要求,从而实现对肝素的鉴定。
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