固相萃取_气相色谱法同时测定花生中18种有机氯农药残留

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固相萃取-气相色谱法同时测定花生中

18种有机氯农药残留

朱臻怡　冯　民　何　健　熊华萱　曾　义

(淮安出入境检验检疫局,淮安　223001)

　　摘要　利用气相色谱(GC)建立了花生中18种有机氯农药同时测定的方法。花生中有机氯农药残留通过乙腈提取,减压浓缩后过弗罗里固相萃取柱净化,采用正己烷-丙酮(体积比为9∶1)溶液淋洗,淋洗液氮吹近干后以正己烷定容,应用微池电子捕获检测器(μECD)检测。氟氯氰菊酯和溴氰菊酯的检出限分别为50和100g/kg,其余16种有机氯农药检出限均为10μg/kg。在花生样品中添加检测限水平有机氯混标溶液,加标回收率为71.28%～

116.58%,测定结果的相对标准偏差为4.08%～18.16%(n=4或5)。关键词　气相色谱　固相萃取　有机氯农药　花生　　有机氯农药为广谱杀虫剂,在花生种植中被广泛使用,在环境中容易造成残留进入食物链中而影响人体健康。随着农产品农药残留问题的日趋严重和食品安全问题的国际化,发达国家和组织对花生中农药残留纷纷制定了严格的限量标准。花生作为我国在国际市场中具有相对竞争优势的农产品,其出口遭受到了一系列的SPS措施的阻碍,其中农药残留限量标准日趋严格,检测项目不断增加。因此花生中有机氯农药残留量检测对于保障人们饮食健康及我国花生进出口贸易具有重要意义。　　目前在我国有机氯农药已被定为出口花生残留监控的项目。对于有机氯农药的残留分析,国内外报道较多。国家标准和行业标准采用GC/ECD测定

[4,5]

[1-3]

　　电子天平:MettlerAE240型,瑞士梅特勒公司;　　均质机:NISSEIACE型,日本精机制作所;　　旋转蒸发器:R-201型,上海申科机械研究所;　　正己烷、丙酮、乙腈:农残级,美国Tedia公司;　　农药标准品:德国Ehrenstorfer博士实验室和农业部环境保护科研监测所;

　　Florisil固相萃取小柱:1000mg,6mL,美国Agi2lent公司。

1.2　气相色谱分析条件

　　色谱柱:DB-1柱(30m×0.32mm,0.25μm);检测器:微池电子捕获检测器;载气:高纯氮气,流量为1mL/min;检测器补偿气:高纯氮气,流量为60mL/min;进样口温度:200℃;检测器温度:320℃;柱温:初始柱温150℃,保持2min,以6℃/min升至270℃,保持23min;进样量:1.0μL,采用

,该法灵敏度高,定量准确,能够同时检测14

种和10种有机氯农药,但前处理自动控制程度低,提取净化效率不高,速度慢,试剂消耗量大。农业部制定了蔬菜和水果中有机氯农药多残留检测方法

[6]

分流阀关闭30s的不分流进样方式。1.3　样品预处理

。但到目前为止,国内外尚未有花生中有机氯

农药多残留分析方法的报道。笔者利用气相色谱

(GC/ECD)技术对花生中18种有机氯农药同时测定,以乙腈提取,液-液分配和固相萃取净化的手段,有效地降低了花生本底干扰,提高了检测灵敏度,可满足残留检测和目前国外检测限量(MRL)的需要,提高了目前花生中有机氯农药的多残留检测能力。1　实验部分1.1　主要仪器与试剂

　　样品经花生粉碎机粉碎均匀。

　　(1)提取

　　准确称取样品25g(精确到0.01g)于250mL均质杯中,加入50mL乙腈,均质2min。在100mL具塞量筒内放5g氯化钠,放一铺有滤纸的玻璃漏斗,过滤均质好的样品,过滤完全后盖上塞子,剧烈震荡1min,在室温下静置约10min,让乙腈相和水相分层。准确吸取10mL乙腈相溶液(上层)放入鸡心瓶中,在50℃水浴上减压旋转蒸发至干。　　(2)净化

　　用5mL10%正己烷-丙酮(体积比为9∶1)

　　收稿日期:2009209225

　　气相色谱仪:60N型,配有微池电子捕获检测器、氮磷检测器和AgilentG2070AA化学工作站,

美国Agilent公司;

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化学分析计量2010年,第19卷,第1期　　

对Florisil固相萃取柱(1g)预淋洗,再加5mL正己烷,当溶剂液面到达柱吸附层表面时,立即将鸡心瓶中用2mL正己烷溶解的样品溶液加到已条件化的Florisil柱上,并用15mL离心管接收洗脱液,靠重力过柱,逐滴流下,如果流速过慢适当加压,使溶液成滴连续流下。用5mL10%正己烷-丙酮(体积比为9∶1)洗鸡心瓶,当液面到达柱吸附层表面时,加到柱上洗脱,再用5mL10%正己烷-丙酮(体积比为9∶1)洗鸡心瓶重复洗脱一次,将15mL离心管接收的洗脱液放在氮吹仪(水浴温度55℃)上,通氮气缓缓蒸发至5.0mL,用正己烷准确定容至5.0mL,然后在旋涡混合器上混匀试管中的溶液,用于GC分析。2　结果与讨论2.1　色谱柱　　通过试验考察了DB-1、DB-170l、DB-5柱的分离效果,结果发现DB-1对有机氯农药分离效果较好,因此实验选择DB-1柱。2.2　提取溶剂　　花生中含有大量油脂,前处理难度较大。实验选择不同的溶剂提取,由添加回收试验比较发现,乙腈的提取回收率较高,且测定干扰较少,因此选择乙腈为提取液。2.3　固相萃取条件　　比较了Florisil固相萃取小柱、氧化铝固相萃取小柱与硅胶固相萃取小柱3种正相固相萃取小柱。通过标准溶液过柱试验,发现3种萃取小柱中,Flo2risil固相萃取小柱的回收率几乎达到100%,而氧化铝固相萃取小柱与硅胶固相萃取小柱的回收率仅达80%左右,因此选用Florisil固相萃取小柱作为净化小柱。由于不同柱容量的固相萃取柱对花生的净化效果影响很大,比较了200mg/3mL,500mg/3mL和1000mg/6mL3种不同柱容量的Florisil固相萃取柱,发现1000mg/6mLFlorisil固相萃取柱在净化花生提取液时具有较好的净化效果,本底干扰在ECD信号中降至最低。

　　洗脱剂的选择直接关系到测定结果的回收率,由于待测的18种有机氯农药的极性范围较宽,单一溶剂不能将待测组分洗脱完全,通过试验比较了不同体积比的正己烷-丙酮溶液,发现当正己烷与丙酮的体积比为9∶1时洗脱效果较好。对于浓度范围在0.010～0.500mg/L的有机氯农药标准溶液,10mL左右的淋洗液用量回收率达到90%以上,因此

柱净化过程选择10mL正己烷-丙酮(体积比9∶1)洗脱液。

2.4　工作曲线、线性范围与检测限

　　根据已检结果,选用3份阴性未加有机氯样品进行分析,以阴性样品在保留时间前后0.5min的噪音的标准偏差的3倍相应值所对应的浓度为方法的检出限。分别取一定浓度的系列有机氯标准溶液进行气相色谱分析,以色谱峰面积(X)对标准溶液浓度(Y)作图进行线性回归,各有机氯农药组分的线性方程、线性范围与检出限列于表1。

表1　各有机氯农药工作曲线方程、线性范围和检测限农药名称五氯硝基苯艾氏剂狄氏剂异狄氏剂百菌清甲氰菊酯酮DDT(p,p′2ddd)DDT(p,p′2dde)DDT(p,p′2ddt)DDT(o,p′2ddt)氰戊菊酯1氰戊菊酯2溴氰菊酯林丹(C-666)氯氟氰菊酯(功夫)毒死蜱氟氯氰菊酯1氟氯氰菊酯2三氯杀螨醇

检出限/ng・g-1

10101010101010101010101010100101010505010

线性回归方程

Y=0.0508X-35.116Y=0.0305X+15.83Y=0.4499X-19.571Y=0.0447X-1.4578Y=0.5201X-18.703Y=0.0709X-.117Y=0.2091X-19.2Y=0.0625X-13.944Y=0.3819X-44.579Y=0.2858X-48.187Y=0.6161X-60.188Y=0.9934X-39.799Y=0.0357X+14.423Y=0.4125X-36.388

线性范围/相关系数

(r2)ng・g-1

10～100010～100010～100010～100010～100010～100010～100010～100010～100010～100010～100010～100010～100010～1000

0.99360.99870.99600.99690.99970.99840.99650.99860.99690.99030.99090.99910.99410.99560.99850.99430.99860.99970.99910.9974

Y=0.0134X+8.871110～1000

Y=0.9433X+35.665100～5000

Y=0.0698X-5.047610～1000Y=3.0742X-71.877Y=1.5075X-133.38

50～200050～2000

Y=0.0373X-4.8310～1000

2.5　单组分测试的添加回收率与精密度试验

　　选取花生阴性样品,在其中分别添加一定浓度水平的18种有机氯农药单个标准溶液,各水平平行测定5次,实验结果列于表2。各有机氯农药组分回收率均能满足检测要求。

2.6　多组分测试的添加回收率与精密度试验

　　在花生样品中分别添加一定浓度水平的有机氯农药混合标准溶液,各水平平行测定5次,测定结果列于表3。表3试验结果表明,方法平均回收率为71.28%～116.58%,相对标准偏差为4.08%～18.16%。空白样品谱图和检出限添加水平的18种

有机氯农药谱图分别见图1、图2。

　　由表2、表3结果可知,回收率与精密度数据符合国家规定残留分析对准确度与精密度的要求,从

朱臻怡,等:固相萃取-气相色谱法同时测定花生中18种有机氯农药残留

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而说明该方法具有可靠性与可行性。

表2　单组分有机氯农药回收和精密度试验结果农药名称五氯硝基苯艾氏剂狄氏剂异狄氏剂百菌清甲氰菊酯酮DDT(o,p′2ddt)DDT(p,p′’2ddt)DDT(p,p′2dde)DDT(p,p′’2ddd)林丹(C2666)毒死蜱氟氯氰菊酯氯氟氰菊酯(功夫)三氯杀螨醇氰戊菊酯溴氰菊酯

添加量/ng・g-1

1010101010101010101010101050101010100

测定值/ng・g-1

9.961(n=4)9.160(n=5)8.990(n=5)8.982(n=4)7.520(n=4)9.070(n=5)9.538(n=5)8.950(n=4)9.918(n=5)8.721(n=5)8.869(n=4)8.0(n=5)10.388(n=5)10.987(n=5)8.994(n=5)10.388(n=4)10.904(n=5)8.037(n=5)

平均回收率/%

99.6191.60.90.8275.2090.7095.38.5099.1887.2188.6985.40103.88109.87.94103.88109.0480.37

RSD/%2.2811.799.0216.968.0211.046.7510.6820.879.047.8516.835.237.508.096.196.0813.14

1—五氯硝基苯;2—林丹;3—艾氏剂;4—百菌清;5—毒死蜱;6—三氯杀螨醇;7—酮;8—P,P′2DDE;9—狄氏剂;10—异狄氏剂;11—O,P′2DDT;12—P,P′2DDD;

13—P,P′2DDT;14—甲氰菊酯;15—氯氟氰菊酯;16—氟氯氰菊酯;17—氰戊菊酯;18—溴氰菊酯

图2　花生中添加检出限水平有机氯农药色谱图

表3　多组分有机氯农药回收和精密度试验结果(n=5)农药名称五氯硝基苯

异狄氏剂林丹氯氟氰菊酯(功夫)甲氰菊酯p,p′2DDE艾氏剂溴氰菊酯p,p′2DDT狄氏剂百菌清酮p,p′2DDDo,p′2DDT氰戊菊酯毒死蜱氟氯氰菊酯三氯杀螨醇

添加水平/ng・g-1

1010101010101010010101010101010105010

测定值/ng・g-1

10.9449.16010.23610.311.24310.43110.6829.20411.65810.7347.12.1369.87.5519.6608.8169.5629.446

平均回收率/%

109.4491.60102.36106.43112.43104.31106.8292.04116.58107.3471.21.3695.4875.5196.6088.1695.6294.46

RSD/%12.8613.5913.2114.4014.0813.8113.1114.2217.8813.4814.3910.7818.1610.8715.279.8611.4212.66

的验证过程中应用了“倒推式”验证方法,即通过添加回收试验,一次从方法的最后一个步骤到第一个步骤验证其回收率,从而分析出影响回收率的主要步骤,进而有所侧重地改善方法,以提高方法的回收率。通过多次验证试验,该方法中影响回收率的主要步骤在于样品提取,因此,该方法通过减少提取步骤而提高了回收率。3　结语　　采用固相萃取-气相色谱法对花生中18种有机氯农药残留进行分析,有机氯农药组分在给定的色谱条件下得到了较好的分离。从线性范围、检测限、准确度、精密度等方面进行了优化验证,该方法对实际样品分析的检出限为10μg/kg(氟氯氰菊酯和溴氰菊酯的检出限分别为50和100μg/kg),方法的准确度与精密度符合相关要求。该方法具有灵敏、快速、简便等特点,能够满足实际应用的需要。

参考文献

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[S].

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类农药多种残留的测定[S].

图1　花生空白色谱图

[6]　NY/T761　无公害食品蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除

　　为了了解影响方法回收率的主要因素,在方法

虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定[S].

22

化学分析计量2010年,第19卷,第1期　　

SIMULTANEOUSDETERMINATIONOF18KINDSOFORGANOCHLORINEPESTICIDESRESIDUES

INPEANUTBYSOLID-PHASEEXTRACTIONANDGASCHROMATOGRAPHY

ZhuZhenyi,FengMin,HeJian,XiongHuaxuan,ZengYi

(HuaianEntry-ExitInspectionandQuarantineBureau,Huaian　223001,China)

　　ABSTRACT　Amethodwasdevelopedforthesimultaneousdeterminationof18kindsoforganochlorinepesticideresiduesin

peanutwithsolid-phaseextractionandgaschromatograph.Residueswereextractedfrompeanutsamplewithacetonitrile,purifiedthroughflorisilSPEcolumnandwashedwithhexane-acetone(volumeratiowas9∶1).Elutionliquidwasdilutedwithhexanetovol2umeafternitrogenblowingjusttodryness,thentheresiduesinitwasanalyzedbygaschromatographwithmicrocellelectroncapturede2tector.Thedetectionlimitswere50and100μg/kgforcyfluthrinanddeltamethrinrespectively,andtheremaining16kindsoforgano2chlorinepesticidesresiduedetectionlimitswere10μg/kg.Theaddingrecoveriesrangedfrom71.28%to116.58%,andtherelativestandarddeviationsofrepeatabilitydetectionresultswere4.08%-18.16%(n=4or5).

KEYWORDS　gaschromatography,solid-phase,organochlorinepesticides,peanut农药国家标准审查会议在厦门召开全国农药标准化技术委员会五届一次会议暨2009年农药国家标准审查会议于2009年11月30日-12月4日在福建省厦门市召开,国家标准化管理委员会农业食品部、农标委及生产企业代表共102人出席会议。会议由全国农药标准化技术委员会副主任委员叶纪明、祝建华、潘灿平和秘书长赵欣昕共同主持。叶纪明副主任委员致开幕词,国家标准化管理委员会农业食品部刘小明向大会宣读了第五届农药标准化技术委员会组成方案的批复,农标委秘书处向大会报告了四届农标委五年来的工作情况及未来5年的工作计划,向大会通报了2008年农药国家标准、行业标准的复审结果和农标委换届改选的相关信息。农标委委员陈铁春、副主任委员祝建华和潘灿平分别向大会作了题为《农药质量管理与GLP》、《质谱技术在农药分析中的应用》和《农药分析实验室的数据质量保证》的学术报告。

标准起草单位沈阳化工研究院和农业部农药检定所等单位向大会报告了吡虫啉原药、乳油、可湿性粉剂、悬浮剂、可溶液剂、水分散粒剂、微乳剂;赤霉酸原药、乳油、可溶粉剂;哒螨灵原药、乳油、可湿性粉剂;绿麦隆原药、可湿性粉剂;硫酰氟;氯磺隆原药、可湿性粉剂、水分散粒剂;杀虫单原药、可溶粉剂;溴氰菊酯原药、乳油;乙羧氟草醚原药、乳油;乙酰甲胺磷原药、乳油、可溶粉剂;农药酸(碱)度测定方法

-指示剂等29项国家标准的送审稿,对分析方法和技术指

府决策提供咨询,向社会提供信息服务。(李超)

我国建立完善进口食品安全监管制度

我国建立了一整套进口食品质量安全监管制度和保障措施,确保了进口食品的安全,国家质检总局进出口食品俞太尉近日对媒体说。

俞太尉表示,经过多年的探索与实践,中国建立了一整套进口食品质量安全监管制度和保障措施,主要从风险管理、检验检疫、质量安全监控等方面入手。

(1)科学的风险管理制度。按照WTO/SPS协定及国际

通行做法,中国对肉类、蔬菜等高风险进口食品实行基于风险管理的检验检疫准入制度,对出口国申请向中国出口的高风险食品开展风险分析,对风险可接受的食品与出口国主管部门签署检验检疫议定书,对国外生产企业实施卫生注册,对动植物源性食品实施进境检疫审批等。如果出口国发生了动植物疫情疫病或严重的食品安全卫生问题,及时采取相应的风险管理措施。

(2)严格的检验检疫制度。进口食品到达口岸后,中国

出入境检验检疫机构依法实施检验检疫,只有经检验检疫合格后方允许进口。入境地海关凭检验检疫机构签发的入境货物通关单办理进口食品的验放手续,之后在中国市场上销售。在检验检疫时如发现质量安全和卫生问题,立即对存在问题的食品依法采取相应的处理措施。

(3)完善的质量安全监控制度。在依法对进口食品实

标的确立依据作了说明,会议还审查了18个农药暂定通用名。经过28名与会委员的无记名投票,29项标准中有2标准的赞成票超过3/4,通过了审查,有一项标准还需进一步补充完善并提供相应的实验数据。

(李超)

施检验检疫的同时,实施风险项目的安全监控。对发现严重问题或多次发现同一问题的进口食品及时发出风险预警,采取包括提高抽样比例、增加检测项目、暂停进口在内的严格管制措施。

(4)严厉的打击非法进口制度。中国国家质检总局与

广西730万组建农业产业技术创新“集团军”

广西壮族自治区财政厅日前安排730万元资金,启动现代农业产业技术创新团队建设,以提升全区农业科技创新能力,增强广西农产品核心竞争力。

该技术创新团队将围绕广西农业产业发展需求,集聚优质资源进行共性技术和关键技术的研究、集成、试验及示范服务,收集、分析农产品的产业及技术发展动态与信息,为政

海关总署建立了关检合作机制,联合打击非法进口食品行为。2006年与欧盟委员会签署了《中欧联合打击非法进出口食品行为合作安排》,明确了双方将通过开展信息通报、技术合作、专家互访和联合专项打击行动措施等,共同打击欺诈、夹带、非法转口、走私等非法进出口食品行为。

(中国经济网)