乙型肝炎血清标志物检测和hbv-dna检测在诊断乙型肝炎中的应用价值

袁　勇，夏鑫杭

（上海市奉城医院检验科，上海　201411）

[摘要]目的：探讨乙型肝炎血清标志物检测和乙型肝炎病毒基因（HBV-DNA）检测在诊断乙型肝炎中的应用价值。方法：将2017年1月至2019年2月期间在奉城医院进行检验的200份疑似乙型肝炎患者的血液标本作为研究对象。对这200份血液标本均进行乙型肝炎血清标志物检测和HBV-DNA检测，然后对检测结果进行分析。结果：对这200份血液标本进行乙型肝炎血清标志物检测的结果是：其中有107份血液标本的检测结果为“大三阳”（HBsAg、HBeAg、HbcAb检测的结果均呈阳性），有74份血液标本的检测结果为“小三阳”（HBsAg、HBeAb、HbcAb检测的结果均呈阳性），有19份血液标本的检测结果为其他异常结果（除大三阳和小三阳以外的异常检测结果）。与检测结果为小三阳、其他异常结果的检测标本相比，进行乙型肝炎血清标志物检测的结果为大三阳的血液标本中HBV-DNA的阳性检出率较高，P＜0.05。在HBV-DNA检测结果呈阳性的检测标本中，HBeAg的阳性检出率高于HBsAg的阳性检出率，P＜0.05。结论：乙型肝炎血清标志物检测和HBV-DNA检测在诊断乙型肝炎中；具有较高的应用价值。

[关键词]乙型肝炎血清标志物；乙型肝炎病毒基因；乙型肝炎

[中图分类号]R446　　　　　　　　　　　　　[文献标识码]B　　　[文章编号]2095-7629-（2020）02-0157-03

Hepatitis b serum marker detection and HBV - DNA testing application value in the diagnosis of hepatitis b

Yuan Yong,Xia Xinhang

(department of clinical laboratory, Shanghai fengcheng hospital, Shanghai 201411)

[Abstract] Objective: To explore the value of hepatitis b serum marker detection and hepatitis b virus gene (hbv-dna) detection in the diagnosis of hepatitis b. Methods: 200 blood samples of suspected hepatitis b patients were tested at fengcheng hospital between January 2017 and February 2019. The 200 blood samples were tested for hepatitis b serum markers and hbv-dna, and then the test results were analyzed. Results: of the 200 blood samples for the testing results of the hepatitis b serum marker is: there are 107 blood samples test results for the “big 3 this world” (HBsAg, HBeAg, HbcAb test results were positive for), the test results of 74 blood specimen for “small 3 this world” (HBsAg, HBeAb HbcAb test results are positive), 19 samples test results of blood samples for other abnormal results (other than the big 3 this world, small 3 this world abnormal test results). The positive detection rate of hbv-dna in blood samples with hepatitis b serum markers was higher than those with small sanyang and other abnormal results ,P < 0.05. In the test samples with positive hbv-dna test results, the positive detection rate of HBeAg was higher than that of HBsAg,P < 0.05. Conclusion: hepatitis b serum marker test and hbv-dna test in the diagnosis of hepatitis b; It has high application value.

[key words] serum markers of hepatitis b; Hepatitis b virus gene; Hepatitis b

世界卫生组织的调查结果显示，乙型肝炎排在全球十大致死性疾病中的第七位。目前，全球每年约有数十万人因罹患乙型肝炎而死亡。相关的统计数据显示，在全球60亿人口中，约有一半的人生活在乙型肝炎病毒（HBV）感染的高发区，约有3～4亿人已发生慢性HBV感染。相关的研究表明，慢性HBV感染是导致原发性肝癌的主要原因，约有80%的慢性乙型肝炎患者的病情可发展为原发性肝癌。另外，慢性乙型肝炎也是导致肝硬化和肝细胞癌(HCC)的主要原因[1]。目前，我国每年乙型肝炎的发病率仍较高。最新的统计数据显示，我国约有1亿多例无症状乙型肝炎表面抗原携带者[2]。近年来，我国居民HBV的感染率虽然有所下降，但乙型肝炎的发病率仍排在全球乙型肝炎发病率的第一位[3]。早期发现和早期治疗是我国控制乙型肝炎的主要措施。为了进一步提高乙型肝炎的确诊率，寻找一种快捷、有效地检测方法成为临床研究的重要课题。本次研究主要是探讨乙型肝炎血清标志物检测和乙型肝炎病毒基因（HBV-DNA）检测在诊断乙型肝炎中的应用价值。1　资料与方法1.1　一般资料

本次研究的对象为2017年1月至2019年2月期间在奉城医院进行检验的200份疑似乙型肝炎患者的血液标本。这200份血液标本涉及的患者均为男性，其年龄为30～60周岁。

1.2　研究方法

对这200份血液标本均进行乙型肝炎血清标志物检测和HBV-DNA检测，然后对检测结果进行分析。具体的方法是：1）采集检测标本。在同一时间采集患者的两管全血，将其中的一管全血作为乙型肝炎血清标志物检测标本，需在采集完成后的24 h内进行检测；将另一管全血作为HBV-DNA检测标

本，在采集完成后将其冷藏一周再进行检测[4]。2）本次研究

使用的检测仪器为全自动免疫化学发光仪和ABI 7500全自动基因扩增检测仪。3）使用化学发光微粒子免疫检测（CMIA）技术对血液标本中的乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb）、乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）、乙型肝炎病毒e抗体（HBeAb）和乙型肝炎病毒核心抗体（HBcAb）进行检测，方法是：⑴对血液标本进行离心处理后提取血清，将血清分别与包被有不同的乙型肝炎抗原或抗体的顺磁颗粒进行结合，在形成相应的抗原-抗体-顺磁颗粒复合物后，在复合物中添加含有发光底物吖啶酯标记的抗体结合物，再通过预激发液和激发液的反应测量复合物中所产生的化学发光反应。⑵根据复合物出现发光反应前生成的校准曲线判断血清中乙型肝炎抗原或抗体的浓度，血清中乙型肝炎抗原或抗体的浓度若超过正常范围则判定其中相应的乙型肝炎抗原或抗体为阳性[5-7]。乙型肝炎血清标志物的阳性范围是：HbsAg的浓度≥0.05 Iu/mL，HbsAb的浓度≥10 mIU/mL，HbeAg的S/CO≥1.0，HbeAb的S/CO≤1.0，HbcAb的S/CO≥1.0。⑶按照乙型肝炎血清标志物检测结果的判定标准将血液标本分为“大三阳”（HBsAg、HBeAg、HbcAb检测的结果均呈阳性）、“小三阳”（HBsAg、HBeAb、HbcAb检测的结果均呈阳性）和其他异常结果（除大三阳和小三阳以外的异常检测结果）三大类型。4）使用聚合酶链反应(PCR)法和TaqMan 荧光定量检测法对血液标本进行HBV-DNA检测，方法是：⑴对血液标本进行PCR扩增，在此期间将一个荧光报告基团（R）标记探针和一个荧光猝灭基团（Q）标记探针分别添加在HBV-DNA模板的两端，再用Taq酶降解探针进行引导，当Q基团对R基团的抑制作用消失后R基团会发出一个荧光信号，然后荧光检测系统再通过检测到的荧光信号的数量计算初始模版的数量。进行扩增循环的参数为

作者简介：袁勇（1983—），男，苗族，主管检验师，研究方向：免疫学、微生物学，E-mail：1877104@163.com

158《当代医药论丛》Contemporary Medical Symposium 2020 年 第 18 卷 第 2 期　·检测与诊断·94℃2 min、60℃30 s循环40次[8]。⑵HBV-DNA的正常范围是：HBV-DNA的浓度＜1000 cps/mL。1.3　观察指标

观察对这些血液标本进行乙型肝炎血清标志物检测和HBV-DNA检测的结果。1.4　统计学处理

对本次研究中的数据均采用SPSS 20.0统计软件进行处理，计量资料用均数±标准差（计数资料用百分比（%）表示，采用x±χs）表示，采用t检验，²检验。以P＜0.05表示差异具有统计学意义。2　结果

2.1　对这200份血液标本进行乙型肝炎血清标志物检测的结果

对这200份血液标本进行乙型肝炎血清标志物检测的结果是：其中有107份血液标本的检测结果为“大三阳”，有74份血液标本的检测结果为“小三阳”，有19份血液标本的检测结果为其他异常结果。

2.2　不同检测结果的血液标本中HBV-DNA阳性检出率的比较

在107份乙型肝炎血清标志物检测结果为大三阳的血液标本中，有101份血液标本的HBV-DNA检测结果呈阳性，其HBV-DNA的阳性检出率为94.39%。在74份乙型肝炎血清标志物检测结果为小三阳的血液标本中，有40份血液标本的HBV-DNA检测结果呈阳性，其HBV-DNA的阳性检出率为.05%。在19份乙型肝炎血清标志物检测结果为其他异常结果的血液标本中，有1份血液标本的HBV-DNA检测结果呈阳性，其HBV-DNA的阳性检出率为5.26%。对这三种乙型肝炎血清标志物检测结果异常的血液标本进行非参数检验的结果显示，与检测结果为小三阳、其他异常结果的检测标本相比，进行乙型肝炎血清标志物检测的结果为大三阳的血液标本中HBV-DNA的阳性检出率较高，P＜0.05。详见表1。

表1不同乙型肝炎血清标志物检测结果的血液标本中HBV-DNA的阳性检出率Tab1 Comparison of HBV-DNA Positive Detection Rates in

Different Modules

乙型肝炎血清标志物检测结果例数HBV-DNA检测结果阳性（n）阳性检出率（%）大三阳10710194.39小三阳7440.05其他模块1915.26总计

200

145

2.3　HBV-DNA检测结果与乙型肝炎血清标志物检测结果的比较

在HBV-DNA检测结果为阳性的血液标本中，HbsAg的阳性检出率为77.9%(141/181)，HbeAg的阳性检出率为87.07%(101/116)； HBeAg的阳性检出率高于HBsAg的阳性检出率，P＜0.05。详见表2。

表2 HBV-DNA检测结果与乙型肝炎血清标志物检测结果

的比较[n（%）]Tab2 Comparison of hbv-dna positive detection rates in

blood samples of different modules[n（%）]

HBV-DNAHBsAgHBeAg阳性阴性阳性

阴性阳性141(77.9)1(5.26)101(87.07)41(48.81)阴性40(22.01)18(94.74)15(12.93)43(51.19)总计

181

19

116

84

3　讨论

乙型肝炎是临床上常见的慢性传染病。该病可诱发广泛的肝脏疾病，并可引发肝性脑病、肝肾综合征、肝功能异常、肝硬化等病理性改变[9]。HBV主要是通过输血、医源性接触、母婴接触和性接触等方式进行传播 [10]。乙型肝炎血清标志物是患者发生乙型肝炎感染的标志物，是临床上诊断乙型肝炎的传统检测项目。但是，进行此项检测只能为判断乙型肝炎患者的病程提供大致的参考，无法准确地反映出其体内病毒复制的情况，具有一定的局限性[11]。有研究表明，对乙型肝炎的患者进行HBV-DNA检测的灵敏度高，可检测出其血清中微量的HBV，有利于对其病情进行早期诊断。这是因为，检测聚合酶链式反应可特异性地反映乙型肝炎患者血清中HBV-DNA的含量，其灵敏度和准确度均高于进行乙型肝炎血清标志物检测。进行HBV-DNA检测不仅可确定乙型肝炎患者HBV的复制活性，还可对其病情进行动态监测 [12]。有研究表明，联用进行乙型肝炎血清标志物检测与HBV-DNA检测可准确地判断出乙型肝炎患者的传染性及HBV的复制活性。相关的研究表明，HBV-DNA检测结果为阳性的患者，其体内HBV的复制活性较高，具有极强的传染性。多数HBsAg、HBeAb、HbcAb检测结果为阳性的患者，其体内HBV的复制减少，但还有部分传染性[13-14]。相关的研究结果表明，乙型肝炎患者若进行乙型肝炎血清标志物检测的结果为全阴性而进行HBV-DNA检测的结果为阳性，说明其体内的HBsAg正在恢复，其病毒血症被消除，不具有传染性。部分急性乙型肝炎患者或慢性乙型肝炎患者若进行乙型肝炎血清标志物检测的结果为HbsAg阴性但仍可检测到低水平的HBV-DNA，说明其体内存在HBV感染[15-16]。相关的调查结果显示，血清HbsAg为阴性但HBV-DNA为阳性的乙型肝炎患者占慢性肝病患者的32%～60%。慢性肝病患者发生隐匿性HBV感染可能与以下因素有关：1)HBV基因发生变异。S基因的突变可导致部分氨基酸发生替换缺失，进而可改变 HBsAg 的抗原性或影响 HBsAg 的表达，使 HBsAg不再表达。2)乙型肝炎患者处于HBV消失的早期阶段，致使其体内 HBsAg 的水平很低，使用普通ELISA进行HBsAg检测的灵敏度不高，无法准确地检出HbsAg，但其体内的HBV-DNA仍在进行低水平的复制，因此仍可在其血清中检测到HBV。3) HBV的表达降低。HBV的病毒颗粒组装或分泌若出现改变，可导致HBV在被感染肝细胞中的基因表达降低或HBsAg可能隐藏在免疫复合物中未被检出[17]。本次研究发现，乙型肝炎HbeAg的阳性检出率与HBV-DNA的阳性检出率的一致性较乙型肝炎HbsAg的阳性检出率与HBV-DNA的阳性检出率高。这说明，乙型肝炎患者体内HBeAg 的含量与 HBV-DNA的含量可能存在一定的关系，即多数HBV-DNA为阳性患者可能是乙型肝炎HBeAg 携带者。有研究表明，乙型肝炎血清HbeAg是HBV复制活跃的标志物，是诊断乙型肝炎的重要血清标志物之一。因此，通过乙型肝炎血清HBeAg的检测值可间接地判断出患者体内HBV复制和感染的活跃度[18]。乙型肝炎血清HBsAg可持续存在于无症状携带者或发生HBV感染后1～2周的患者体内。因此，只要简单地检测出患者乙型肝炎血清HbsAg为阳性，即表示其已感染HBV，但不能明确地判断目前其体内HBV的复制状态。有研究表明，在诊断乙型肝炎时，不

《当代医药论丛》Contemporary Medical Symposium 2020 年 第 18 卷 第 2 期　·检测与诊断·能仅依赖于进行乙型肝炎血清标志物检测，还要进行HBV-DNA检测，以便通过患者体内HBV-DNA的载量判断其体内HBV的复制情况，为其后续治疗提供参考[19]。

综上所述，乙型肝炎血清标志物检测和HBV-DNA检测在诊断乙型肝炎中具有较高的应用价值。

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用彩色多普勒超声检查诊断胎儿先天性心脏病的效果分析

王　轩

（射阳县人民医院，江苏　射阳　224300）

[摘要]目的：探讨用彩色多普勒超声检查诊断胎儿先天性心脏病的临床效果。方法：选择2017年5月至2018年5月期间在射阳县人民医院进行产前检查的79例孕妇及其所孕的79例患有先天性心脏病的胎儿（其病情均在引产或出生后经解剖或手术探查得到确诊）作为本文的研究对象。在这79例孕妇妊娠27周前，对其均进行彩色多普勒超声检查与二维超声心动图检查，然后比较其检查结果及用这两种检查方式诊断其胎儿患有先天性心脏病的准确率、敏感性和特异性。结果：与对这79例孕妇进行二维超声心动图检查相比，对其进行彩色多普勒超声检查时其胎儿的左室收缩末期内径、左室舒张末期内径、收缩期左室后壁厚度、舒张期左室后壁厚度和肺动脉主干内径均更大，其主动脉窦部内径更小，差异有统计学意义，P＜0.05。用彩色多普勒超声检查诊断这79例孕妇的胎儿患有先天性心脏病的准确率、灵敏性和特异性均高于用二维超声心动图检查诊断其胎儿患有先天性心脏病的准确率、灵敏性和特异性，差异有统计学意义，P＜0.05。结论：用彩色多普勒超声检查诊断胎儿先天性心脏病的准确性、灵敏性和特异性均较高。

[关键词]彩色多普勒超声检查；胎儿；先天性心脏病；二维超声心动图检查

[中图分类号]R445　　　　　　　　　　　　　[文献标识码]B　　　[文章编号]2095-7629-（2020）02-0159-02

先天性心脏病是一种常见的先天畸形。有文献报道称，患有先天性心脏病的活产婴儿占我国活产婴儿总数的8‰～12‰。先天性心脏病是导致我国新生儿和儿童死亡的主要原因之一。进行彩色多普勒超声检查是临床上诊断胎儿先天性心脏病的主要手段之一。本文主要是研究用彩色多普勒超声检查诊断胎儿先天性心脏病的效果。1　资料与方法1.1　一般资料

本文的研究对象是2017年5月至2018年5月期间在射阳县人民医院进行产前检查的79例孕妇及其所孕的79例患有先天性心脏病的胎儿。这79例胎儿的病情均在引产或出生后经解剖或手术探查得到确诊。在这79例孕妇中，排除存在多胎妊娠、病历资料缺失及不愿参与本次研究的孕妇。这些孕妇的年龄为23～34岁，平均年龄为（28.45±5.35）岁；其参与本次研究时的孕周为19～26周，平均孕周为（22.56±3.44）周；其中，首次妊娠的孕妇有51例，再次妊娠的孕妇有28例。1.2　方法

1.2.1 彩色多普勒超声检查 对这79例孕妇进行彩色多普勒超声检查的方法是：将彩色多普勒超声诊断仪探头的频率设为5～7 Hz。协助孕妇取仰卧位，暴露其腹部。在其腹部和超声探头上涂抹医用耦合剂，用超声探头对其宫腔及胎儿的情况进行扫查，重点对其胎儿心脏的各个切面进行扫查。观察胎儿左心房、左心室、右心房和右心室的大小、位置和结构，明确其左心室流出道和右心室流出道的情况，观察其主动脉、上腔静脉、肺动脉及气管的位置，判断其是否存在房间隔缺损、室间隔缺损及肺动脉狭窄等情况[1]。1.2.2 二维超声心动图检查 对这79例孕妇进行二维超声心动图检查的方法是：将超声探头的频率设为3.5 Hz。协助孕妇取仰卧位，暴露其腹部，为其连接心电图仪。用超声探头对其胎儿的心脏进行扫查，观察胎儿心脏大血管的位置及与心脏的关系、心脏瓣膜的活动度、厚度及房室间隔