高效液相使用注意事项

来源：爱问旅游网

高效液相使用注意事项

流动相更换注意事项

1、流动相使用前必须经脱气和过滤处理。

2、避免流动相组成及极性的剧烈变化。

当流动相中含有缓冲溶液（酸，盐，碱），不要直接切换到强溶剂，应该先用无缓冲流动相（即把缓冲液换成水），冲洗20～30min后,再更换强溶剂，更换流动相时，流速应不超过0.5ml/min。如果突然切换到高浓度有机溶剂，可能会使HPLC流动体系中的缓冲液沉淀，这样会导致更大的问题如柱头堵塞、管道堵塞、泵泄漏、活塞损伤或进样阀转轴失灵。

3、测试完毕后，切忌直接用纯有机溶剂冲洗柱子，须用90%水-10%有机溶剂（如流动相是缓冲液，应用纯水或含5%有机溶剂-水溶液）冲洗至少40min后，再用有机溶剂冲洗30min左右，最后将色谱柱保存在有机溶剂中。

4、测试完毕后，应将整个通道流路切换到有机溶剂中。吸滤头每周用5%水溶液超声清洗1次。

色谱柱更换注意事项

1、更换色谱柱前，须对使用的色谱柱进行冲洗（如应用的流动相含有酸或无机盐，应当用20倍柱体积纯净水冲洗干净）、平衡后，保存在有机溶剂中（最好是乙腈或甲醇中）。

2、取下色谱柱时，应立即将两端接头封口。

3、除特殊情况外，一般都应使用预保护柱。

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